Fúzní značky – sekvence aminokyselin, které jsou geneticky zakódovány pro expresi jako připojené části k proteinu – mají potenciál zvýšit aktivitu nativního enzymu, umožnit specifické čištění enzymu a podpořit jednoduchou a účinnou imobilizaci enzymů na materiálové nosiče. V této práci demonstrujeme vliv fúzní značky Strep-tag II na vlastnosti volné a imobilizované lipázy B z Candida antarctica (CALB). Gen kódující zralou část CALB byl kodonově optimalizován a klonován do plazmidu pASG-IBA2 pro expresi v E. coli. Purifikovaný rekombinantní Strep-tag II CALB byl afinitní vazbou imobilizován na nosič na bázi Strep-Taktinu a imobilizovaný a volný Strep-tag II CALB byly porovnány s komerčním CALB. Po modifikaci bylo možné enzym selektivně purifikovat z kultivačních médií bez pozorovatelné nespecifické vazby. Katalytická účinnost purifikovaného enzymu s fúzním značením byla výrazně vyšší než katalytická účinnost komerčního CALB ve volné formě. Imobilizace fúzně značeného enzymu na zesíťovaný agarosový nosič modifikovaný Strep-Tactinem poskytla katalyticky aktivní enzym; kcat imobilizovaného enzymu však bylo ve srovnání s volným značeným enzymem výrazně sníženo. Tato práce naznačuje, že fúzní značka Strep-tag II s koncem C může být použita ke zlepšení katalytické účinnosti volného CALB, ale nemusí být vhodná pro imobilizované aplikace, které využívají vazbu enzymu na nosič modifikovaný Strep-Taktinem.
.